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分子实验
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病理实验
动物实验
分子实验
含目的基因的载体构建
含目的基因的载体构建: 构建载体,然后将已经扩增的目的片段通过酶切构建在载体上。
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免疫共沉淀
免疫共沉淀: 基于抗体抗原的免疫性反应,检测两个蛋白分子之间是否存在相互作用。免疫共沉淀是对抗原和目的蛋白的结合能力的检测。
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免疫沉淀
免疫沉淀: 通过抗体抗原特异性反应达到纯化富集目的蛋白(抗原)的一种方法。抗体与上清液中的蛋白结合反应后,再和二抗偶联的珠子孵育,得到珠子-二抗-抗体-目的蛋白复合物,
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高通量测序
高通量测序:可以一次对几十万到几百万的DNA或RNA分子进行序列测定,从而分析样本异常表达的基因。
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ELISA实验
ELISA实验: 指将可溶性的抗原或抗体结合到聚苯乙烯等固相载体上,利用抗体抗原特异性免疫结合的原理,从而实现定性和定量检测。
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PCR实验
PCR实验: PCR又称聚合酶链式反应,是指在DNA聚合酶催化下,以母链DNA为模板,以特定引物为延伸起点,通过变性、退火、延伸等步骤,体外复制出与母链模板DNA互补的子链DNA的过程。
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Western Blot实验
蛋白质印记又称免疫印记,根据抗原抗体的特异性结合检测样品中的某种蛋白的方法。它是利用特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色,通过分析着色的位置和着
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微生物实验
质粒载体构建
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慢病毒载体构建
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基因编辑
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微生物菌种保藏
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活性蛋白改造
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大肠杆菌基因改造
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微生物活性测试
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微生物定量/定性检测
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细胞实验
Transwell实验
Transwell实验 :铺Matrigel胶,细胞重悬液接种一定数量的细胞于上室,下室放入含20%血清的完全培养基,培养箱培养24小时,固定后,加入结晶紫染液,显微镜下拍摄。
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ROS检测
ROS检测: 细胞贴壁后,制作探针工作液,孵育细胞,清洗细胞后,在荧光显微镜下观察。
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Hoechst检测细胞凋亡实验
Hoechst检测细胞凋亡实验: 细胞贴壁培养后,甲醇固定细胞,加入Hoechst液孵育后,再荧光显微镜下计算细胞凋亡实验。
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划痕实验
划痕实验 :细胞铺满35mm皿内,200L的枪头划痕,PBS清洗,加入含有2%血清的培养基,显微镜下观察,二氧化碳培养箱培养24小时,显微镜下拍照。
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β- 半乳糖苷酶染色
β-半乳糖苷酶染色: 细胞贴壁培养后,细胞固定液固定细胞,PBS冲洗,- 半乳糖苷酶染色工作液染色,然后在显微镜下观察。
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细胞免疫组化
细胞免疫组化: 将重悬的细胞接种在60mm的皿内,将细胞载玻片倾斜放入培养皿内,制作细胞爬片,固定后,免疫组化笔圈出圈圈,阻断过氧化物酶,封闭后,过夜孵育一抗,再孵育二
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平板克隆实验
平板克隆实验 :细胞重悬液,取合适的细胞于35mm皿的培养,加入含药物的培养基,培养10天,期间每隔3天换液一次,甲醇固定,姬姆萨染液染色,拍摄细胞群落。
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血管生成实验
血管生成实验:将重悬的细胞悬液接种在ibidi血管生成板内,培养一定时间后,然后在显微镜下观察。
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ALP染色
ALP染色:细胞贴壁培养后,弃上清液,加入ALP工作液孵育,然后在显微镜下观察。
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外泌体提取
外泌体提取: 将细胞扩增,然后无血清培养,离心后收集细胞,滤膜过滤,然后在4摄氏度的100000g离心70分钟,弃上清液,再加入遇冷的PBS,再次超速离心。
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病理实验
天狼猩红染色
I型胶原纤维:紧密排列,显示很强的双折光性,呈黄色或红色。II型胶原纤维:显示弱的双折光,呈多种色彩的疏松网状分布。III型胶原纤维:显示弱的双折光,呈绿色的细纤维。IV型胶原纤维:显示弱的双折光的基膜,呈淡黄色。
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组织免疫组化
组织免疫组化 :制作石蜡切片,烘片脱蜡后,阻断过氧化物,抗原修复,封闭,4度过夜孵育一抗,孵育二抗,DAB显色,中性树胶封片,显微镜下观察。
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HE染色
HE染色 :通过固定、脱水、透明、包埋和切片实验步骤制作石蜡切片,烘片脱蜡后,HE染色,中性树胶封片,显微镜下观察。
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Masson染色
Masson染色 :制作石蜡切片,烘片脱蜡后,Masson染液染色,中性树胶封片后,显微镜下观察。
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PAS染色
PAS染色:制作石蜡切片,烘片脱蜡后,阿利新蓝染色液染色,氧化剂氧化,Schiff Reagent染液浸染,苏木素复染,中性树胶封片后,显微镜下观察。
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组织免疫荧光
组织免疫英光 :制作石蜡切片,烘片脱蜡后,阻断过氧化物,抗原修复,封闭,4度过夜孵育一抗,孵育二抗,DAPI孵育,防荧光猝灭剂,中性树胶封片,荧光显微镜下观察。
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番红O染色
番红O染色 :制作石蜡切片,烘片脱蜡后,番红染色后,中性树胶封片后,显微镜下观察。
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甲苯胺蓝法染色
甲苯胺蓝法染色 :脱钙后,制定石蜡切片,烘片脱蜡后,甲苯胺蓝工作液染色,显微镜下观察。
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动物实验
后爪关节炎模型
后爪关节炎模型 :固定大鼠四肢,酒精消毒四肢,大鼠左足垫下注射FCA,然后每天观察药物反应和后爪情况。
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脑瘫模型
脑瘫模型 :麻醉后固定大鼠,颈部正中皮肤纵向切口,切开胸骨舌骨肌,暴露气管。沿气管两侧分离左右颈总动脉,将双侧颈总动脉用3-0缝合线结扎。同时剪断大鼠尾端放血,放血量控
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脓毒症模型
脓毒症模型 :麻醉后固定大鼠,腹部正中皮肤纵向切口,钝性分离盲肠,暴露盲肠于体外,在盲肠基底部与其末端之间的中点处使用结扎。针头于盲肠末端与结扎位置的中部,沿肠系膜
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CUMS抑郁症模型
CUMS抑郁症模型 :将禁食、禁水、夹尾、昼夜颠倒、悬尾和湿垫料等6种应激因子按随机方法在21天内应用。每日给予1种刺激,每种刺激累计使用3~4次,并进行无规律顺序刺激。通过蔗糖
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心脏纤维化模型
心脏纤维化模型 :麻醉后固定大鼠,腹部正中皮肤纵向切口,暴露视野,用浸有生理盐水的纱布将大鼠的肠管推向右侧,暴露腹主动脉。在肾动脉分支上方分离腹主动脉,腹主动脉结
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主动脉弓缩窄术TAC模型
主动脉弓缩窄术TAC模型 :麻醉后固定大鼠,颈部正中皮肤纵向切口,进行气管插管,连接呼吸机。从左胸部位剪开皮肤,钝性分离肋间肌,充分暴露肋骨,开胸,分开胸腺,暴露主动脉
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银屑病模型
银屑病模型 :小鼠背部脱毛,每天咪喹莫特乳膏连续涂抹7天。
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小鼠过敏性皮肤炎模型
小鼠过敏性皮肤炎模型 :小鼠背部脱毛,每天涂抹DBP,每天涂抹一次,共涂抹40天,第41到47天小鼠背部涂抹FITC进行致敏。在第47天,用FITC涂抹于小鼠右耳进行激发。
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脑出血模型
脑出血模型 :麻醉后固定大鼠,手术刀片正中失状切开,用过氧化氢溶液剥蚀骨膜,充分暴露颅骨。以前卤为原点,向其右方3mm处用牙科钻钻一直径约1mm的圆孔,将微量注射器沿钻孔方
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移植瘤模型
移植瘤模型 :麻醉后固定裸鼠,取出保存在组织保存液的肿瘤组织样本,生理盐水清洗,将组织样本植入裸鼠皮下。
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