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科研干货|倒置显微镜详细介绍及使用过程

2025-04-21 18:04:11
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倒置显微镜组成和普通显微镜一样,但其物镜与照明系统颠倒,前者在载物台之下,后者在载物台之上。

倒置显微镜常被用于微生物、细胞、细菌、组织培养、悬浮体、沉淀物等的观察,可连续观察细胞、细菌等在培养液中繁殖分裂的过程,并将此过程中的任一形态拍摄下来。

小编以NikonTi2-u为例整理了倒置显微镜的详细结构介绍以及使用步骤,一起来学一下吧~


一、倒置显微镜的仪器介绍

①仪器的开关机


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上方图片依次为:①荧光灯开关

                ②显微镜开关

                ③照相机开关

开关顺序:1、常规开机顺序:①-②-③

          2、不使用荧光的顺序:②-③

          3、关机顺序:③-②-①

                    

②仪器的设备硬件


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上方图片红色标记处依次为:

1、SHUTTER键:◯开启 ⚫关闭

2、荧光强度键: 数值越大,强度越弱,反之亦然

3、使用时长的显示(开关时间至少间隔半小时)


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上方图片红色标记处依次为:

1、相机

2、粗细准焦螺旋

3、光强度调节

4、明场光源开关


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上方图片红色标记处依次为:

1、明场光源SHUTTER:c-close/o-Open

2、孔径光阑

3、杠杆:调节聚光镜距离

4、相差环:需与物镜相匹配,PHL对应4X、PH1对应10X、20X,其他均使用PH2


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1、上图为载物台

2、下图为适配器,可以根据培养血、培养瓶等不同的样品容器进行更换


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上方图片红色标记处依次为:

1、物镜台

2、通道选择:明场通道1~6/荧光通道2~5

3、荧光SHUTTER:C-Close/O-Open

4、载物台操纵杆:调节载物台高度

5、粗细准焦螺旋

6、观察方式选择:肉眼/相机


二、倒置显微镜的操作步骤

①明场采图

1、放置样本。

2、打开明场采图开关。

3、选择合适相差环。

4、调整载物台,确定视野范围。

5、调节左侧光强度,选择合适的物镜。

6、选择1或6通道。

7、选择右下侧肉眼观察模式。

8、调节粗细准焦螺旋对焦,选择左相机观察模式。

9、在Nis-elements点击预览,调节曝光。

10、调好白平衡:红绿蓝三峰重合。

11、点击相机图标即拍摄。


②荧光采图

1、关闭全部明场开关。

2、打开SHUTTER键,调节荧光强度。

3、选择物镜。

4、选择通道2-5,打开荧光SHUTTER2。

5、选择肉眼观察模式,调至图像清晰后再选择左侧相机模式。

6、选择匹配的物镜。

7、在Nis-elements点击预览,右侧调节曝光时间及焦面,调至图像清晰。

8、调焦完毕后,点击相机图标进行拍摄。

9、切换通道,按需要进行拍摄。

10、关闭荧光SHUTTER2。

11、选择对应merge通道。

13、merge完毕后,按需对所需的通道进行调节。


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